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大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書主要包括實(shí)驗(yàn)原理、試劑盒內(nèi)容、樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟及注意事項(xiàng)等部分?。
BS-8545 大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒 試劑盒廠家:天津本生
實(shí)驗(yàn)原理
大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。已知SDH濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將SDH和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中SDH的濃度呈比例關(guān)系?。
試劑盒內(nèi)容:
試劑盒通常包含以下組件(以96孔配置為例):
96孔板(預(yù)包被)1塊
96孔板覆膜若干
標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液
生物素標(biāo)記的抗SDH抗體
親和鏈酶素-HRP
洗滌緩沖液
底物A、B
終止液::
使用說明書1份?12樣本處理
血清或血漿樣本應(yīng)避免溶血、高血脂,懸浮物應(yīng)離心去除。
樣本應(yīng)盡早檢測,2-8℃保存不超過48小時(shí);長時(shí)間保存需冷凍(-20℃或-80℃),避免反復(fù)凍融?3。
實(shí)驗(yàn)步驟
?洗滌液配置?:用蒸餾水按一定比例稀釋濃縮洗滌液?。
?標(biāo)準(zhǔn)品配制?:按說明書要求對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行稀釋,制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液?。
?加樣?:將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入微孔中,加入生物素化抗體工作液,溫育并洗滌。
?加酶?:加入親和素標(biāo)記的HRP,再次溫育并洗滌。
?顯色?:加入底物A、B,避光反應(yīng),產(chǎn)生顏色。
?終止?:加入終止液,終止反應(yīng)。
?讀數(shù)?:用酶標(biāo)儀在波長下測定吸光度,計(jì)算樣品濃度?。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)過程中需嚴(yán)格控制溫育時(shí)間和溫度。
洗滌步驟要,以去除未結(jié)合的試劑。
底物顯色反應(yīng)需在避光條件下進(jìn)行。
樣本稀釋倍數(shù)需根據(jù)實(shí)際情況確定,必要時(shí)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)?。
以上信息僅供參考,具體實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)應(yīng)以試劑盒附帶的使用說明書為準(zhǔn)。
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